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詳細(xì)分析豬ELISA檢測(cè)試劑盒的技術(shù)流程

發(fā)布時(shí)間:2020-06-18   點(diǎn)擊次數(shù):1946次
  豬ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬組織因子(TF)。用純化的豬組織因子(TF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加豬組織因子(TF),再與 HRP 標(biāo)記的豬組織因子(TF)抗體結(jié)合,形成抗體抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬組織因子(TF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬組織因子(TF)濃度。
 
  優(yōu)勢(shì):
  1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。
  2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性。
  3、提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)(為客戶提供來樣檢測(cè)服務(wù),*限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性)
  4、產(chǎn)品質(zhì)量保證,提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
  5、友情提醒:試劑盒使用完畢后,請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!
 
  豬ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)流程:(雙抗體夾心法)
  1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
  2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
  3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
  5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
  6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。